目的构建重组原核表达质粒获得HPV18 L1活性蛋白,为进一步研制HPV18基因工程疫苗打下基础. 方法以重组质粒pBR322-HPV 18为模板,利用PCR方法扩增HPV18 L1DNA片段,将HPV18 L1DNA与pUC19质粒重组构建pUC19 -HPV18 L1重组质粒.用酶切电泳验证重组结果的正确性;并通过测序检查质粒重组后序列有无变化.再利用pQE32质粒做表达载体构建pQE32-HPV18 L1重组质粒,并用酶切电泳验证. 结果 PCR扩增DNA片段约为1.7Kb,与预期结果相同.pUC1 9-HPV1 8 L1克隆重组质粒酶切后显示4.39Kb,酶切图谱与预期相同.测序验证插入片段全序列无改变.pQE32-HPV18 L1表达重组质粒酶切后显示其大小约5.16Kb,酶切图谱亦与预 p期相同. 结论 pQE32-HPV18 L1表达重组质粒构建成功.
作者:李迪;谷鸿喜;张凤民;钟照华;程志
来源:哈尔滨医科大学学报 2002 年 36卷 2期