目的:研究胆汁淤积时 Sp1对 MRP3、MRP4表达的影响,以完善 MRP3、MRP4表达调控机制。方法构建 Sp1过表达质粒及 Sp1 siRNA 片段,分别转染 HepG2细胞,筛选稳转细胞株。提取细胞总 RNA 和总蛋白,RT-qPCR 检测 MRP3、MRP4 mR-NA 水平的变化,Western blot 检测 MRP3、MRP4蛋白水平的变化。结果成功构建了 Sp1-OE-HepG2和 Sp1siRNA-HepG2稳转细胞株。在 Sp1-OE-HepG2细胞中,MRP3、MRP4 mRNA 和蛋白水平表达均增高,其中 MRP3 mRNA 水平表达增高2.8倍,MRP3蛋白水平表达增高3.0倍;MRP4 mRNA 和蛋白水平分别增高3.2倍和2.5倍;而在 Sp1 siRNA-HepG2细胞中,MRP3、MRP4则表达下降,其中 MRP3 mRNA 表达降低52%,MRP4 mRNA 表达降低58%,MRP3蛋白表达降低57%,MRP4蛋白表达降低60%。结论转录因子 Sp1能够调控胆酸转运蛋白 MRP3、MRP4的表达。
作者:陈琨;柴进;封欣婵;程英;张睴君;胡珍;陈兰芳;陈文生;何勇虹
来源:局解手术学杂志 2016 年 25卷 7期