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目的 探究外泌体miR-20a-5p对非小细胞肺癌(NSCLC)骨转移的调控作用及机制.方法 提取并鉴定16HBE、A549、PC9、H1299细胞以及转染miR-20a-5p mimic和miR-NC的A549细胞所分泌的外泌体.qRT-PCR检测各种细胞及外泌体中miR-20a-5p的表达.将A549 和RAW264.7 细胞分为PBS组、16HBE exo组、A549 exo组、miR-NC exo组和miR-20a-5p exo组.Transwell小室检测A549细胞迁移和侵袭能力,TRAP染色检测破骨细胞分化.Western blot检测各组RAW264.7细胞Sp1和CD147的表达.6周龄的雌性Balb/c裸鼠随机分为5组,分别注射PBS(A组)、16HBE exo(B组)、A549 exo(C组)、miR-NC exo(D组)和miR-20a-5p exo(E组)外泌体4周,构建NSCLC骨转移的小鼠模型;HE染色观察各组小鼠骨转移情况.结果 透射电镜下观察到A549 exo、PC9 exo、H1299 exo、16HBE exo为具有双层膜的囊泡样结构,粒径在30~100 nm,且均表达CD9、CD81、HSP70标志蛋白.miR-20a-5p高表达于NSCLC细胞及其外泌体.与PBS组相比,A549 exo组肿瘤细胞迁移和侵袭能力显著增加(P<0.001),RAW264.7细胞中miR-20a-5p表达上调(P<0.001),破骨细胞分化显著增加(P<0.001),Sp1和CD147表达显著增加(P<0.001).与miR-NC exo组相比,miR-20a-5p exo组A549细胞迁移和侵袭能力增加(P<0.001),RAW264.7细胞中

作者:王贇;胡雯;刘理礼;杨静;张涛

来源:局解手术学杂志 2023 年 32卷 9期

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作者:
王贇;胡雯;刘理礼;杨静;张涛
来源:
局解手术学杂志 2023 年 32卷 9期
标签:
非小细胞肺癌 外泌体 miR-20a-5p 骨转移 裸鼠 Sp1/CD147信号通路 non-small cell lung cancer exosome miR-20a-5p bone metastasis nude mouse Sp1/CD147 signaling pathway
目的 探究外泌体miR-20a-5p对非小细胞肺癌(NSCLC)骨转移的调控作用及机制.方法 提取并鉴定16HBE、A549、PC9、H1299细胞以及转染miR-20a-5p mimic和miR-NC的A549细胞所分泌的外泌体.qRT-PCR检测各种细胞及外泌体中miR-20a-5p的表达.将A549 和RAW264.7 细胞分为PBS组、16HBE exo组、A549 exo组、miR-NC exo组和miR-20a-5p exo组.Transwell小室检测A549细胞迁移和侵袭能力,TRAP染色检测破骨细胞分化.Western blot检测各组RAW264.7细胞Sp1和CD147的表达.6周龄的雌性Balb/c裸鼠随机分为5组,分别注射PBS(A组)、16HBE exo(B组)、A549 exo(C组)、miR-NC exo(D组)和miR-20a-5p exo(E组)外泌体4周,构建NSCLC骨转移的小鼠模型;HE染色观察各组小鼠骨转移情况.结果 透射电镜下观察到A549 exo、PC9 exo、H1299 exo、16HBE exo为具有双层膜的囊泡样结构,粒径在30~100 nm,且均表达CD9、CD81、HSP70标志蛋白.miR-20a-5p高表达于NSCLC细胞及其外泌体.与PBS组相比,A549 exo组肿瘤细胞迁移和侵袭能力显著增加(P<0.001),RAW264.7细胞中miR-20a-5p表达上调(P<0.001),破骨细胞分化显著增加(P<0.001),Sp1和CD147表达显著增加(P<0.001).与miR-NC exo组相比,miR-20a-5p exo组A549细胞迁移和侵袭能力增加(P<0.001),RAW264.7细胞中