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目的 观察脂磷壁酸(LTA)对单核细胞系(U937)刺激后中药黄芪对其所表达的炎性因子的影响,探讨其调节革兰阳性菌脓毒症炎症反应的部分机制.方法 体外培养U937细胞,选取不同浓度LTA进行孵育,在不同时间点进行相关测定.MTT法检测细胞的增殖活性,酶联免疫吸附测定法(ELISA法)检测上清液中促炎因子IL-8及抗炎因子IL-10的表达,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞核内IL-8 mRNA及IL-10 mRNA的表达.结果 LTA(3 ~ 30 mg/mL)刺激U937细胞32 h内,细胞增殖活性无明显变化(P>0.05);而以LTA60 mg/mL组及3~30 mg/mL LTA刺激40 h时,细胞增殖活性明显降低(P<0.05).ELISA结果显示,LTA能明显上调U937表达促炎因子IL-8及抗炎因子IL-10,且其表达与LTA浓度及时间呈正相关,其中LTA 30 mg/mL在8~32 h时IL-8及IL-10表达有统计学意义(P<0.05),且以16 h时IL-8的释放量为最高峰,以24h时IL-10的释放量为最高峰.黄芪可减低LTA刺激U937表达促炎因子IL-8含量,促进LTA刺激U937表达抗炎因子IL-10的释放量,且黄芪0.2 mg/mL组在16 h、24 h及32 h时与LTA30组比较差异有统计学意义(P<0.05),IL-10的释放高峰提前至16 h.RT-PCR结果显示,LTA组和LTA+黄芪组IL-8 mRNA、IL-10 mRNA表达及变化趋势与IL-8和IL-10一致.结论 中药黄芪在革兰

作者:路玲;王勇强;高红梅

来源:中国急救医学 2015 年 35卷 1期

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作者:
路玲;王勇强;高红梅
来源:
中国急救医学 2015 年 35卷 1期
标签:
脂磷壁酸(LTA) U937细胞系 促炎因子 抗炎因子 Lipoteichoic acid U937 cells Pro-inflammatory factor Anti-inflammatory cytokine
目的 观察脂磷壁酸(LTA)对单核细胞系(U937)刺激后中药黄芪对其所表达的炎性因子的影响,探讨其调节革兰阳性菌脓毒症炎症反应的部分机制.方法 体外培养U937细胞,选取不同浓度LTA进行孵育,在不同时间点进行相关测定.MTT法检测细胞的增殖活性,酶联免疫吸附测定法(ELISA法)检测上清液中促炎因子IL-8及抗炎因子IL-10的表达,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞核内IL-8 mRNA及IL-10 mRNA的表达.结果 LTA(3 ~ 30 mg/mL)刺激U937细胞32 h内,细胞增殖活性无明显变化(P>0.05);而以LTA60 mg/mL组及3~30 mg/mL LTA刺激40 h时,细胞增殖活性明显降低(P<0.05).ELISA结果显示,LTA能明显上调U937表达促炎因子IL-8及抗炎因子IL-10,且其表达与LTA浓度及时间呈正相关,其中LTA 30 mg/mL在8~32 h时IL-8及IL-10表达有统计学意义(P<0.05),且以16 h时IL-8的释放量为最高峰,以24h时IL-10的释放量为最高峰.黄芪可减低LTA刺激U937表达促炎因子IL-8含量,促进LTA刺激U937表达抗炎因子IL-10的释放量,且黄芪0.2 mg/mL组在16 h、24 h及32 h时与LTA30组比较差异有统计学意义(P<0.05),IL-10的释放高峰提前至16 h.RT-PCR结果显示,LTA组和LTA+黄芪组IL-8 mRNA、IL-10 mRNA表达及变化趋势与IL-8和IL-10一致.结论 中药黄芪在革兰