目的 探讨腺病毒载体介导转铁蛋白受体报告基因(TFRC)转染人结直肠癌Lovo细胞的最佳感染复数(MOI)、目标基因表达情况及体外MR成像情况.方法 采用介导转铁蛋白受体报告基因的腺病毒(Ad-TFRC)载体以5、10、50、100的MOI转染Lovo细胞,以实时定量PCR检测相应mRNA表达.以浓度不一的转铁蛋白(Tf)-超微超顺磁性氧化铁(USPIO)探针转染细胞后,经普鲁士蓝染色确定最佳浓度,并以台盼蓝染色评价细胞活力.采用7.0T MR以T2、T2 map及T2*map序列对目标细胞成像,分析信号强度差异.结果 Ad-TFRC成功转染Lovo细胞,最佳MOI值为50,感染效率>90%;实时定量PCR检测显示Ad-TFRC转染Lovo细胞中TFRC蛋白表达量较空白对照Lovo细胞增多(P<0.01);普鲁士蓝染色结果示探针铁浓度为1.5 μg/ml时最佳,Lovo细胞内可见大量蓝染铁颗粒;探针标记的Lovo细胞及空白对照Lovo细胞盼蓝染色拒染率分别为(93.80±1.60)%和(95.10±2.30)%,差异无统计学意义(P>0.05);体外MR T2W、T2 map及T2* map成像显示,与空白对照Lovo细胞比较,探针标记的Lovo细胞信号强度减弱(P<0.05).结论 腺病毒载体可在Lovo细胞中高效表达转铁蛋白受体报告基因,磁化标记后可成功实现Lovo细胞的体外7.0T MR显像.
作者:续梦玲;王一帆;何花;郜发宝;郭玉林
来源:中国介入影像与治疗学 2018 年 15卷 5期