目的构建弓形虫P30基因表达载体并获得重组表达蛋白. 方法将弓形虫P30基因的开读框用PCR扩增,NcoⅠ和HindⅢ酶切后,与同样酶切的表达质粒pET-30a(+)经T4连接酶连接,然后转化到DH5α中.菌液经PCR扩增和质粒酶切及基因测序鉴定后,将阳性重组质粒转化到大肠埃希菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导,表达产物用SDS-PAGE和Western blot进行鉴定. 结果扩增的P30基因片段为750 bp,重组质粒诱导表达产物分子质量单位为30 ku,与理论值相符 .Western blot 确认重组质粒表达蛋白与小鼠抗弓形虫单克隆抗体(P30 McAb)发生特异性反应. 结论成功构建重组体并获得弓形虫主要表面抗原P30的高效表达产物,为弓形虫病的诊断和疫苗研究奠定了基础.
作者：张佃波；公茂庆；魏庆宽；李谨；黄炳成；刘克义
来源：中国寄生虫病防治杂志 2005 年 18卷 2期
