目的 建立SYBR-Green1荧光定量PCR检测弓形虫的方法,并进行实验室方法学评价.方法 常规PCR扩增弓形虫RH株高度保守的B1基因部分序列,经TA克隆后转化入大肠埃希菌JM109中.提取重组质粒,PCR及测序鉴定后,作为阳性模板建立SYBR-Green1荧光定量PCR标准曲线,并做重复性试验,对桂弓、B36虫株及恶性疟原虫、血吸虫基因组DNA、30份孕产妇标本、1 221份无偿献血者标本进行检测.结果 用重组质粒制作的标准曲线循环阈值与模板浓度有良好的线性关系,溶解曲线特异,相关系数0.997,平均试验间变异系数0.81
作者：朱祥明；杨通汉；杨国庆；赵杨；姚富柱
来源：中国病原生物学杂志 2007 年 2卷 6期
