目的构建弓形虫单价基因疫苗 pcDNA3.1-p30 及复合基因疫苗pcDNA3.1-p30-ROP2, 并比较两种疫苗对小鼠的免疫保护性. 方法用聚合酶链反应(PCR)从弓形虫RH株基因组DNA中分别扩增编码弓形虫主要表面抗原p30和弓形虫棒状体蛋白2(ROP2)的基因片段, 经T-A克隆, 将p30 单价基因及p30-ROP2 复合基因片段分别插入真核细胞表达载体pcDNA3.1, 构建重组真核表达质粒pcDNA3.1-p30 及 pcDNA3.1-p30-ROP2.分别免疫BALB/c小鼠, 设磷酸缓冲盐溶液(PBS)组、pcDNA3.1 空质粒组为对照;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清特异性IgG抗体;弓形虫速殖子腹腔攻击感染观察小鼠生存时间. 结果获得pcDNA3.1-p30、pcDNA3.1-p30-ROP2重组表达质粒, 用pcDNA3.1-p30-ROP2免疫的小鼠, 其IgG抗体吸光度(A 490 =2.051±0.337)高于用pcDNA3.1-p30的吸光度(A 490 =1.892±0.369)(P<0.05).攻击感染弓形虫后小鼠生存时间, 用pcDNA3.1-p30-ROP2免疫的小鼠, 较用pcDNA3.1-p30的明显延长(P<0.01). 结论弓形虫不同生活阶段的抗原复合基因疫苗较单价基因疫苗具有更好的免疫保护性.
作者：杨婷婷；何深一；蒋华；古钦民；丛华；周怀瑜；张加勤；李瑛；赵群力
来源：中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2005 年 23卷 1期
