目的 提高标签引物-套式/多重PCR诊断疟疾的敏感性、特异性与稳定性.方法 用滤纸法采集非疟疾发热病人血样30份及其他传染病(感冒,流感,伤寒,肝炎等)患者血样20份;抽取恶性疟和间日疟各1例患者血4ml,进行系列稀释制备不同疟原虫含量的感染血样;健康者血样作对照.用热裂解法制备DNA模板,用线粒体细胞色素氧化酶基因作为靶基因,应用相关软件和网络资源(Primer Premier 5.0,PUBMED,NCBI-BLAST和Mfold服务器)设计和优化标签引物-套式/多重PCR,并用于检测所采集制备的各种血样.结果 间日疟与恶性疟患者血系列稀释为含1 000、100、10和1个虫/μl后经标签引物-套式/多重PCR检测,恶性疟和间日疟患者各稀释含虫血样分别在611 bp和255 bp出现1条带,能检测到原虫密度均为1个虫/μl血;非疟疾发热病人血样30份及其他传染病患者血样均为阴性;健康者血样未出现扩增条带,每种血样反复测试3次以上均获得同样结果.结论 经优化的标签引物-套式/多重PCR在疟疾诊断中具有较高的敏感性、特异性和稳定性.
作者：郭传坤；黎学铭；李锦辉；毛玮；林珍；杜进发；黄天谊
来源：中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2007 年 25卷 3期
