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[目的]基于兔脂肪干细胞(rabbit adipose-derived stem cells,rADSCs)、利福喷丁聚乳酸微球、同种异体部分脱钙骨支架,初步于体外构建抗结核性骨组织工程复合体.[方法]分离、培养rADSCs,经检测细胞周期、表面抗原CD44及分化诱导鉴定干细胞特性.用利福喷丁生长液干预rADSCs,按浓度分为0μg/ml、20μg/ml、40 μg/ml及60μg/ml四组,分别绘制细胞生长曲线、检测细胞凋亡及碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)含量.制备利福喷丁微球,计算平均直径、载药率及包封率.构建rADSCs-利福喷丁微球二维复合物并成骨诱导.制备骨支架并构建rADSCs-利福喷丁微球-骨支架三维复合物,计算细胞粘附率;扫描电子显微镜及苏木精-伊红(HE)染色观察复合情况;每3d更换生长液,检测体外释药特性. [结果]rADSCs呈长梭形生长,G0/G1期占(80.3±3.2)%,表面抗原CD44阳性表达.成骨诱导后ALP、茜素红染色,成脂诱导后油红O染色及成软骨诱导后阿利新蓝染色均为阳性.生长曲线示60 μg/ml组第4~12d增殖能力较其他三组弱(P<0.01);凋亡检测示60 μg/mL组凋亡率高于其他三组(P<0.01);ALP检测示第7、14 d 60 μg/ml组ALP含量较其他三组少(P<0.05);临界浓度为40μ∥ml.微球平均直径为(26.4±3.6)μm,载药率为(40.89±0.63)%,包封率为(75.24±

作者:梁求真;折胜利;宋兴华;呼西旦;毕晓娟;罗兰;马艳;蒋岳华;白晶晶

来源:中国矫形外科杂志 2014 年 22卷 19期

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梁求真;折胜利;宋兴华;呼西旦;毕晓娟;罗兰;马艳;蒋岳华;白晶晶
来源:
中国矫形外科杂志 2014 年 22卷 19期
标签:
骨结核 脂肪干细胞 利福喷丁 骨组织工程 bone tuberculosis adipose-derived stem cells rifapentine bone tissue-engineering
[目的]基于兔脂肪干细胞(rabbit adipose-derived stem cells,rADSCs)、利福喷丁聚乳酸微球、同种异体部分脱钙骨支架,初步于体外构建抗结核性骨组织工程复合体.[方法]分离、培养rADSCs,经检测细胞周期、表面抗原CD44及分化诱导鉴定干细胞特性.用利福喷丁生长液干预rADSCs,按浓度分为0μg/ml、20μg/ml、40 μg/ml及60μg/ml四组,分别绘制细胞生长曲线、检测细胞凋亡及碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)含量.制备利福喷丁微球,计算平均直径、载药率及包封率.构建rADSCs-利福喷丁微球二维复合物并成骨诱导.制备骨支架并构建rADSCs-利福喷丁微球-骨支架三维复合物,计算细胞粘附率;扫描电子显微镜及苏木精-伊红(HE)染色观察复合情况;每3d更换生长液,检测体外释药特性. [结果]rADSCs呈长梭形生长,G0/G1期占(80.3±3.2)%,表面抗原CD44阳性表达.成骨诱导后ALP、茜素红染色,成脂诱导后油红O染色及成软骨诱导后阿利新蓝染色均为阳性.生长曲线示60 μg/ml组第4~12d增殖能力较其他三组弱(P<0.01);凋亡检测示60 μg/mL组凋亡率高于其他三组(P<0.01);ALP检测示第7、14 d 60 μg/ml组ALP含量较其他三组少(P<0.05);临界浓度为40μ∥ml.微球平均直径为(26.4±3.6)μm,载药率为(40.89±0.63)%,包封率为(75.24±