目的:构建可缓释骨形态发生蛋白-2 (bone morphogenetic protein-2,BMP-2)的仿生磷酸钙(biomimetic calcium phosphate,BioCaP)共沉淀三维支架(BMP-2-coprecipitated biomimetic calcium phosphate,BMP-2-BioCaP),检测其理化特性,探究其对人脂肪间充质干细胞(human adipose-derived stem cells,hASCs)体内外成骨分化的影响,最终构建以hASCs和BMP-2-BioCaP为基础的新型组织工程化骨.方法:构建BMP-2-BioCaP三维缓释支架,扫描电子显微镜观察表面形貌,体外检测其缓释能力.将BMP-2-BioCaP颗粒分别浸泡于增殖培养基(proliferation medium,PM)与成骨诱导培养基(osteogenic medium,OM)中,每2天提取上清液用于hASCs的体外培养.CCK-8实验检测各组hASCs的体外增殖能力,诱导7d及14 d后进行碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色及活性定量检测,14 d及21 d进行茜素红染色及矿化沉积定量分析,4d及14 d检测成骨相关基因的表达情况.体内实验使用6只裸鼠,于其背部正中做皮肤切口,向两侧共分离出4个皮下植入腔,分别植入:(1)单纯BioCaP支架,(2)BioCaP支架+hASCs,(3) BMP-2-BioCaP缓释支架,(4) BMP-2-BioCaP缓释支架+hASCs(实验组).植入4周后取材,标本制成组织学切片进行HE染色观察.结果:BioCaP表面由不规则晶体组成三维
作者:姜蔚然;张晓;刘云松;吴刚;葛严军;周永胜
来源:北京大学学报(医学版) 2017 年 49卷 1期