[目的]探讨腺病毒介导共表达人骨形态发生蛋白2 (bone morphogenetic protein 2,BMP2)和血管内皮生长因子165 (vascular endothelia growth factor 165,VEGF 165)载体转染兔骨髓间充质干细胞复合纳米羟基磷灰石/聚酰胺66(nano-hydroxyapatite/polyamide66,n-HA/PA66)体外构建组织工程骨的可行性.[方法]采用密度梯度离心法分离骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs),取第3代BMSCs进行细胞表型鉴定;第3代BMSCs作为细胞实验对象,实验共分2组:Ad-BMP2-VEGF165为实验组和Ad-GFP为对照组;首先用不同感染复数感染BMSCs,并进行ELISA和Westem blot检测细胞hBMP2和hVEGF165的表达;其次将感染后的细胞接种到n-HA/PA66生物材料上,7d后扫描电镜观察细胞贴附、生长状况;同时,7d后消化收集贴附n-HA/PA66上的细胞,Western blot检测贴附生物材料细胞中骨钙素(osteocalcin,OC)和骨桥蛋白(osteopontin,OPN)的表达,以及3d和7d后的碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性测定.[结果]第3代细胞表面高表达CD29 (99.82％)和CD44 (94.14％),低表达CD14 (3.11％)和CD34 (0.34％);腺病毒感染后hBMP2和hVEGF165蛋白水平高表达;扫描电镜见感染细胞分布均匀,生长状态良好.实验组与对照组相比,复合n-HA/PA66后W

作者：张聪；刘洪美；李庆伟；陈国武；梁啸；孟纯阳

来源：中国矫形外科杂志 2015 年 23卷 3期