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背景:重组DNA技术的进展为骨组织工程研究的发展提供巨大动力,将其应用于组织工程骨构建可以显著提高骨修复的质量和效率。<br>  目的:拟将Ad-hBMP-2联合Ad-hTGF-β1转染骨髓间充质干细胞体外成骨诱导,观察二者在成骨过程中的相互关系。<br>  方法:以腺病毒AdMax为基因转移载体,将携带转化生长因子β1和骨形态发生蛋白2基因的高滴度腺病毒感染SD大鼠骨髓间充质干细胞,利用外源性基因编码的生长因子诱导其表达,通过RT-PCR、ELISA、MTT实验及碱性磷酸酶水平检测等方法鉴定。<br>  结果与结论:腺病毒感染骨髓间充质干细胞后RT-PCR可检测出外源基因的表达,MTT实验和碱性磷酸酶活性检测双基因共转染的骨髓间充质干细胞增殖能力最强,碱性磷酸酶活性最高。结果表明联合应用Ad-hTGF-β1和Ad-hBMP-2转染可明显促进骨髓间充质干细胞的成骨化,效果优于单用一种生长因子。

作者:陈剑平;邱俊钦;曾昭勋;陈宗雄;尹承慧

来源:中国组织工程研究 2014 年 50期

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作者:
陈剑平;邱俊钦;曾昭勋;陈宗雄;尹承慧
来源:
中国组织工程研究 2014 年 50期
标签:
干细胞 骨髓干细胞 转化生长因子β1 骨形态发生蛋白2 腺病毒载体 bone marrow mesenchymal stem cels transforming growth factor beta1 bone&nbsp morphogenetic proteins
背景:重组DNA技术的进展为骨组织工程研究的发展提供巨大动力,将其应用于组织工程骨构建可以显著提高骨修复的质量和效率。<br>  目的:拟将Ad-hBMP-2联合Ad-hTGF-β1转染骨髓间充质干细胞体外成骨诱导,观察二者在成骨过程中的相互关系。<br>  方法:以腺病毒AdMax为基因转移载体,将携带转化生长因子β1和骨形态发生蛋白2基因的高滴度腺病毒感染SD大鼠骨髓间充质干细胞,利用外源性基因编码的生长因子诱导其表达,通过RT-PCR、ELISA、MTT实验及碱性磷酸酶水平检测等方法鉴定。<br>  结果与结论:腺病毒感染骨髓间充质干细胞后RT-PCR可检测出外源基因的表达,MTT实验和碱性磷酸酶活性检测双基因共转染的骨髓间充质干细胞增殖能力最强,碱性磷酸酶活性最高。结果表明联合应用Ad-hTGF-β1和Ad-hBMP-2转染可明显促进骨髓间充质干细胞的成骨化,效果优于单用一种生长因子。