目的 观察人重组真核表达质粒pIRES-骨形态发生蛋白2(BMP2)-血管内皮生长因子165 (VEGF165)的体外转染对兔骨髓间充质于细胞成骨分化的影响.方法 以原代分离的兔骨髓间充质干细胞为研究对象,在脂质体的介导下将重组质粒pIRES-BMP2-VEGF165转染至细胞中,采用G418体外筛选稳转细胞株,且在mRNA和蛋白水平上分别检测转染效果.继续培养稳转细胞株,细胞分:空质粒pIRES组、pIRES-BMP2-VEGF165转染组以及成骨诱导剂组;采用Western blot分别检测培养7d和21 d后各组细胞Ⅰ型胶原蛋白(Col Ⅰ)和骨钙素(OCN)蛋白表达水平;培养14 d后,采用Gomori改良钙钴法染色检测碱性磷酸酶活性;培养21 d后,采用茜素红法钙质染色检测各组细胞钙化结节情况.结果 与空质粒pIRES组比较,pIRES-BMP2-VEGF165质粒组细胞在mRNA和蛋白水平上均检测到骨形态发生蛋白2和VEGF165的表达;与空质粒组及成骨诱导剂组比较,重组质粒pIRES-BMP2-VEGF165组细胞Col Ⅰ和OCN蛋白的表达水平均显著提升(Col Ⅰ:0.597±0.040比0.230 0.020,P =0.000;0.597 ±0.040比0.457 ±0.035,P =0.005;OCN:0.433 0.038比0.083 ±0.021,P=0.000;0.433±0.038比0.350±0.036,P=0.046);碱性磷酸酶染色阳性区域占比均显著增加[(69.000±5.568)％比(18.333±3.056)％,P=0.000;

作者：肖飞；焦竞；黄玉成；徐海军；左伟；王俊文

来源：中华实验外科杂志 2018 年 35卷 7期