目的 研究神经生长因子(NGF)对骨形态发生蛋白-9(BMP-9)诱导鼠胚胎成纤维细胞(MEFs)成骨分化的影响. 方法 构建重组腺病毒转染MEFs,分为NGF组、BMP-9组及NGF联合BMP-9组(联合组),以绿色荧光蛋白(GFP)处理为对照组.采用细胞化学染色以及读数检测各组第3,5天碱性磷酸酶(ALP)活性变化,RT-PCR检测第9天骨桥素(OPN) mRNA表达水平,Western blot、免疫细胞化学检测各组第9天OPN蛋白表达水平;茜素红染色检测各组第14天钙盐沉积水平. 结果 BMP-9组ALP活性升高,但NGF组ALP活性无明显变化,联合组ALP活性明显强于NGF组或BMP-9组.对照组、BMP-9组、NGF组及联合组OPN mRNA表达水平分别为0.92±0.03,1.28 ±0.04,0.94±0.03,1.62±0.04(F=214.60,P＜0.01),与BMP-9组比较,联合组OPN mRNA相对表达水平明显升高(t=10.569,P＜0.05).Western blot检测结果显示,对照组、BMP-9组、NGF组及联合组OPN蛋白相对表达水平分别0.60±0.05,0.84 ±0.03,0.53±0.05,1.27±0.05(F=162.50,P＜0.01),与BMP-9组比较,联合组OPN蛋白相对表达水平明显升高(=11.778,P＜0.05).免疫组织化学染色结果显示,对照组、BMP-9组、NGF组及联合组OPN蛋白相对表达水平相对密度分别为3.63 ±0.17,6.27±0.30,3.86±0.18,10.16±0.18(F =602.60,P＜0.01),与BMP-

作者：皮昌军；邹翔；张然熙；吴念；何百成；邓忠良；陈亮

来源：中华创伤杂志 2016 年 32卷 2期