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[目的]探索miR-140对早期骨关节炎(0A)软骨细胞衰老的调控作用及机制.[方法]收集人膝关节正常、早期OA(E-OA)和中晚期OA (ML-OA)软骨组织,酶消化法获得相应组别软骨细胞.首先,PCR检测各组miR-140水平,流式细胞仪分析细胞周期,衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-βGal)试剂盒分析SA-βGal活性,PCR和免疫细胞化学法检测衰老分子p16INK4a、p21和p53的表达.然后,取E-OA软骨细胞设空白、IL-1β、miR-Scr和miR-140 mimic组并给予相应干预,检测并比较各组miR-140水平.最后,取E-OA软骨细胞设空白、IL-1β、miR-Scr+ IL-1β和miR-140 mimic+ IL-1β组并给予相应干预,分析和比较各组细胞周期、SA-βGal活性及衰老分子表达情况.[结果]正常、E-OA和ML-OA三组间miR-140水平、G0/G1期细胞比例(G0/G1%)、SA-βGal活性及衰老分子水平比较差异均有统计学意义(P<0.05),miR-140水平与OA分级呈显著负相关(P<0.05),而G0/G1%、SA-βGal活性及衰老分子阳性率与OA分级呈显著正相关(P<0.05).在E-OA软骨细胞中,与空白组相比,IL-1β组miR-140水平显著降低(P<0.05),miR-Scr组无明显改变(P>0.05),miR-140 mimic组显著升高(P<0.05).在E-OA软骨细胞中,IL-1β组G0/G1%、SA-βGal活性及衰老分子表达均显著高于空白组(P<0.05)、与miR-Scr+

作者:李兰;梁明玮;陆燕蓉;斯海波;沈彬

来源:中国矫形外科杂志 2020 年 28卷 3期

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作者:
李兰;梁明玮;陆燕蓉;斯海波;沈彬
来源:
中国矫形外科杂志 2020 年 28卷 3期
标签:
早期骨关节炎 microRNA-140 软骨细胞 衰老
[目的]探索miR-140对早期骨关节炎(0A)软骨细胞衰老的调控作用及机制.[方法]收集人膝关节正常、早期OA(E-OA)和中晚期OA (ML-OA)软骨组织,酶消化法获得相应组别软骨细胞.首先,PCR检测各组miR-140水平,流式细胞仪分析细胞周期,衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-βGal)试剂盒分析SA-βGal活性,PCR和免疫细胞化学法检测衰老分子p16INK4a、p21和p53的表达.然后,取E-OA软骨细胞设空白、IL-1β、miR-Scr和miR-140 mimic组并给予相应干预,检测并比较各组miR-140水平.最后,取E-OA软骨细胞设空白、IL-1β、miR-Scr+ IL-1β和miR-140 mimic+ IL-1β组并给予相应干预,分析和比较各组细胞周期、SA-βGal活性及衰老分子表达情况.[结果]正常、E-OA和ML-OA三组间miR-140水平、G0/G1期细胞比例(G0/G1%)、SA-βGal活性及衰老分子水平比较差异均有统计学意义(P<0.05),miR-140水平与OA分级呈显著负相关(P<0.05),而G0/G1%、SA-βGal活性及衰老分子阳性率与OA分级呈显著正相关(P<0.05).在E-OA软骨细胞中,与空白组相比,IL-1β组miR-140水平显著降低(P<0.05),miR-Scr组无明显改变(P>0.05),miR-140 mimic组显著升高(P<0.05).在E-OA软骨细胞中,IL-1β组G0/G1%、SA-βGal活性及衰老分子表达均显著高于空白组(P<0.05)、与miR-Scr+