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目的:探讨联合应用多聚腺嘌呤二核苷酸核糖聚合酶-1 (PARP-1)抑制剂3-氨基苯甲酰胺(3-aminobenzamide,3-AB)和Caspase-3抑制剂Z-DEVD-FMK对脊髓损伤大鼠神经细胞凋亡的影响.方法:120只成年健康SD大鼠随机分为假手术组(A组)、模型组(B组)、PARP-1抑制剂组(C组)和联合用药组(D组),每组30只.以Allen's打击法制备大鼠脊髓损伤模型,每组分别于造模后1d、3d、7d取5只大鼠行BBB评分,处死后利用免疫组化方法检测损伤部位脊髓内PARP-1、凋亡诱导因子(AIF)、Caspase-3及Bcl-2的表达;各时间点各组剩余大鼠处死后利用Western blotting检测PARP-1、Caspase-3蛋白表达水平,实时荧光定量PCR检测PARP-1、AIF、Caspase-3及Bcl-2的mRNA水平,采用原位末端标记(TUNEL)法检测神经细胞凋亡情况.结果:造模后1d时B、C、D组大鼠BBB评分均为0分;3d时三组间的评分无统计学差异;7d时D组及C组明显高于B组,且D组最高(P<0.05).免疫组化及Western blotting结果显示,脊髓损伤后1~7d,B组脊髓组织中PARP-1、AIF及Caspase-3表达逐渐增强,Bcl-2表达逐渐减弱(P<0.05);与B组比较,D组及C组的PARP-1、AIF、Caspase-3表达均显著降低,且D组最低(P<0.05);而D组及C组的Bcl-2表达显著高于B组,且D组最高(P<0.05).实时荧光定量PCR检测各目的基因表达

作者:赵伟;张连双;李红星;时彦;李雅娜

来源:中国脊柱脊髓杂志 2015 年 25卷 10期

知识库介绍

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作者:
赵伟;张连双;李红星;时彦;李雅娜
来源:
中国脊柱脊髓杂志 2015 年 25卷 10期
标签:
脊髓损伤 PARP-1抑制剂 Caspase-3抑制剂 凋亡诱导因子 大鼠 Spinal cord injury PARP-1 inhibitor Caspase-3 inhibitor Apoptosis-inducing factor Rat
目的:探讨联合应用多聚腺嘌呤二核苷酸核糖聚合酶-1 (PARP-1)抑制剂3-氨基苯甲酰胺(3-aminobenzamide,3-AB)和Caspase-3抑制剂Z-DEVD-FMK对脊髓损伤大鼠神经细胞凋亡的影响.方法:120只成年健康SD大鼠随机分为假手术组(A组)、模型组(B组)、PARP-1抑制剂组(C组)和联合用药组(D组),每组30只.以Allen's打击法制备大鼠脊髓损伤模型,每组分别于造模后1d、3d、7d取5只大鼠行BBB评分,处死后利用免疫组化方法检测损伤部位脊髓内PARP-1、凋亡诱导因子(AIF)、Caspase-3及Bcl-2的表达;各时间点各组剩余大鼠处死后利用Western blotting检测PARP-1、Caspase-3蛋白表达水平,实时荧光定量PCR检测PARP-1、AIF、Caspase-3及Bcl-2的mRNA水平,采用原位末端标记(TUNEL)法检测神经细胞凋亡情况.结果:造模后1d时B、C、D组大鼠BBB评分均为0分;3d时三组间的评分无统计学差异;7d时D组及C组明显高于B组,且D组最高(P<0.05).免疫组化及Western blotting结果显示,脊髓损伤后1~7d,B组脊髓组织中PARP-1、AIF及Caspase-3表达逐渐增强,Bcl-2表达逐渐减弱(P<0.05);与B组比较,D组及C组的PARP-1、AIF、Caspase-3表达均显著降低,且D组最低(P<0.05);而D组及C组的Bcl-2表达显著高于B组,且D组最高(P<0.05).实时荧光定量PCR检测各目的基因表达