目的:建立大鼠唾液腺上皮细胞体外原代培养模型,为体外研究唾液腺疾病提供种子细胞.方法:在无菌条件下取出生1～2 d的Wistar大鼠腮腺组织,手术显微镜下去除腺体包膜,以无血清培养基(kerotinocyte-SFM)为培养液,并添加表皮生长因子(rat epidermal growth factor,rEGF)、牛垂体提取物(bovine pituitary extract,BPE)、氢化可的松(hydrocortisone,HC)、转铁蛋白(transferrin,Tf)、胰岛素(insulin,INS)等因子,应用组织块培养法进行培养.用倒置相差显微镜观察培养细胞体外生长的形态特征.用H-E染色及细胞角蛋白、波形蛋白免疫组织化学染色对培养的细胞进行形态学检查和鉴定.结果:培养的腮腺上皮细胞为三角形、多边形、圆形、短梭形,细胞单层生长,连接疏松.H-E染色可见细胞多为圆形,核蓝染,细胞有突起、细胞间桥.细胞角蛋白染色阳性,证实所培养细胞为上皮来源;Vimentin、actin和calponin染色细胞大部分呈阳性,进一步确定细胞主要为肌上皮细胞.原代细胞在3～5 d内保持良好的生长状态,并存活1周左右.结论:组织块培养法可以简捷、快速地获得大鼠腮腺上皮细胞,成功建立Wistar大鼠腮腺上皮细胞的体外模型.
作者：韦毅；王代友；成梦；苏曰松
来源：中国口腔颌面外科杂志 2014 年 12卷 6期
