目的:构建人血管内皮细胞缺氧复氧细胞模型,作为组织瓣缺血再灌注损伤的体外研究模型.方法:原代人脐静脉内皮细胞(HUVECs)培养扩增至第5代.依据缺氧时间随机分为4组:正常对照组(Control组),3h/2h组、6h/2h组、9h/2h组;Control组以完全培养基正常培养,实验组分别以低糖无血清培养基于缺氧环境下培养3、6、9h,后换用原完全培养基复氧培养2h.显微镜下大体观察各组细胞形态、结构、数目,台盼蓝实验测定存活细胞比例,CCK-8法测定细胞活性.Annexin V-PI染色流式细胞仪测定细胞凋亡比例.采用SPSS 19.0软件包对数据进行统计学分析.结果:与对照组相比,镜下可见实验组细胞损伤程度明显较高;随缺氧时间延长,损伤加重,细胞密度减低.台盼蓝实验及CCK-8实验结果显示,实验组存活细胞比例及细胞活性较对照组显著降低,且随缺氧时间增加而显著下降(P＜0.05).细胞凋亡实验表明,随缺氧时间增加,细胞早期凋亡、晚期凋亡比例均显著上升(P＜0.05),细胞凋亡水平加重.结论:建立了稳定可靠的人血管内皮细胞缺氧/复氧损伤细胞模型,为组织瓣缺血再灌注损伤的体外实验研究提供了基础.
作者：牛其芳；李德龙；杨杨；秦力铮；冯芝恩；李金忠；韩正学
来源：中国口腔颌面外科杂志 2019 年 17卷 4期
