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目的 应用反义RNA沉默技术,构建针对murA基因的超敏工程菌.方法 将不同murA基因片段插入带有pairedtermini结构的反义表达载体pHN678中,获得重组质粒,导入大肠埃希菌宿主诱导表达.通过生长表型考察不同反义片段对murA沉默效果的影响,并用靶向MurA抑制剂磷霉素验证反义工程菌E.coli DH5α/pHNM2的敏感性及靶向性.结果 反义片段murA1和murA2具有较好的沉默效果,E.coli DH5α/pHNM2对MurA抑制剂磷霉素具有靶标特异性和敏感性.结论 成功获得靶向murA反义工程菌Ecoli DH5 α/pHNM2,并有望进一步应用于MurA特异性抑制剂高通量筛选模型的构建.

作者:李素秋;殷瑜;戈梅;陈代杰;钱秀萍

来源:中国抗生素杂志 2014 年 39卷 6期

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作者:
李素秋;殷瑜;戈梅;陈代杰;钱秀萍
来源:
中国抗生素杂志 2014 年 39卷 6期
标签:
反义RNA技术 murA 靶向筛选 Antisense RNA technology murA Target-specific screening
目的 应用反义RNA沉默技术,构建针对murA基因的超敏工程菌.方法 将不同murA基因片段插入带有pairedtermini结构的反义表达载体pHN678中,获得重组质粒,导入大肠埃希菌宿主诱导表达.通过生长表型考察不同反义片段对murA沉默效果的影响,并用靶向MurA抑制剂磷霉素验证反义工程菌E.coli DH5α/pHNM2的敏感性及靶向性.结果 反义片段murA1和murA2具有较好的沉默效果,E.coli DH5α/pHNM2对MurA抑制剂磷霉素具有靶标特异性和敏感性.结论 成功获得靶向murA反义工程菌Ecoli DH5 α/pHNM2,并有望进一步应用于MurA特异性抑制剂高通量筛选模型的构建.