目的：探讨肌肉注射Notexin是否影响C57BL/6小鼠骨骼肌引流淋巴结内的外源性CD8+T细胞（OT-I细胞）的活性和增殖。方法分别采用Notexin注射或机械挤压法制备B6小鼠的胫骨前肌（TA）急性肌损伤模型，并获得性转移（adoptive transfer, i.v.）OVA特异的OT-I细胞（CFSE标记），随后肌注可溶性OVA蛋白。收集损伤侧TA引流淋巴结(腘、腹股沟淋巴结)，流式分析OT-I细胞的增殖程度。OVA静脉内注射免疫B6鼠，收集激活的脾脏树突状细胞（cDCs），与CFSE标记的OT-I细胞体外联合培养，并添加不同稀释度的Notexin,流式检测OT-I细胞的活性和增殖。结果 CFSE的荧光递减结果证实，机械挤压损伤鼠TA引流淋巴结内OT-I细胞迅速活化增殖，但Notexin诱发的肌损伤小鼠引流淋巴结内OT-I细胞在4 d时无增殖反应，7 d的增殖率与非注射组无显著差异。与活化的cDCs细胞共培养的OT-I细胞活性良好，增殖显著，但即使添加高度稀释（1：1000）的Notexin也会严重干扰OT-I细胞的活性和增殖。结论肌内注射Notexin注射将干扰CD8+T细胞的活性，这表明蛇毒血清诱导的骨骼肌损伤模型不适用于肌损伤诱发的T细胞功能改变的相关研究。
作者：马平；术蓉；刘幸卉；史丹丹；曾慧君；曹标；廖华
来源：中国临床解剖学杂志 2014 年 3期
