目的:探讨发夹状shRNA封阻原癌基因(C-myc),抑制癌细胞增殖、生长的作用.方法:针对c-myc的构建发夹状shRNA的真核表达质粒,并转染人结直肠癌Colo320细胞.荧光定量RT-PCR 检测c-myc及细胞端粒酶逆转录酶的mRNA的表达,Western-blot检测c-myc、端粒酶逆转录酶(hu-man telomerase reverse transeriptase,hTERT)蛋白表达水平.Southern blot检测端粒的长度.PCR-ELISE法检测端粒酶活性.3 H-thymidine实验分析DNA合成和细胞增殖.结果:转染细胞增殖、生长皆受到抑制.同时c-myc和hTERT的mRNA和蛋白表达显著下降,端粒的长度明显缩短.端粒酶活性降低.结论:c-myc的shRNA对人结直肠癌Colo320细胞的生长增殖、端粒长度、端粒酶活性有特异性抑制作用,并呈剂量依赖关系.
作者：黄浩；李秀；肖宏；傅雷；余兰才；林世和；易艳东
来源：中国临床药理学与治疗学 2008 年 13卷 10期
