目的 探讨发夹状shRNA封阻c-mye基因,抑制人结直肠癌Colo320细胞增殖、生长的状况.方法 针对原癌基因e-myc构建发夹状shRNA的真核表达质粒,并转染人结直肠癌Colo320细胞.荧光定量RT-PCR检测c-myc及细胞端粒酶逆转录酶的mRNA表达,Westemn-blot检测c-myc、hTERT蛋白表达水平.Southern blot检测端粒的长度,PCR-ELISE法检测端粒酶活性.3H-thymidine实验分析DNA合成和细胞增殖.结果 转染细胞增殖、生长皆受到抑制.同时,c-myc和hTERT的mRNA和蛋白表达显著下降,端粒的长度明显缩短,端粒酶活性降低.结论 c-myc的shRNA对人结直肠癌Co1p320细胞的增殖、端粒长度、端粒酶活性有特异性抑制作用,并呈剂量依赖关系.
作者:黄浩;李秀;肖宏;傅雷;余兰才;林世和;易艳东
来源:肿瘤防治研究 2009 年 36卷 7期