目的:探讨SUMO化的雄激素受体(andro-gen receptor,AR)参与他莫昔芬耐药的机制以及SUMO抑制剂银杏酸在耐药中的作用.方法:通过Real-Time PCR检测亲本细胞MCF-7W和耐药细胞MCF-7R中AR mRNA水平,Western blot检测MCF-7W和MCF-7R细胞中AR蛋白水平以及SUMO水平,免疫沉淀和染色质免疫沉淀(CB/IP)检测MCF-7R细胞染色质中AR与SUMO E3连接酶PIAS1、HSP27相互作用,荧光报告基因实验检测SUMO化AR的转录活性,CCK-8法、台盼蓝拒染法分别检测细胞活性和细胞活力.结果:MCF-7R细胞中AR的mRNA和蛋白表达水平表达量明显高于MCF-W7细胞(P<0.05),并且MCF-7R细胞中显示高SUMO化的AR;进一步研究发现MCF-7R细胞染色质中AR与SUMO E3连接酶PIAS1、HSP27存在明显相互作用,即SUMO化的AR是由E3连接酶修饰的;双荧光素酶报告基因试剂盒检测发现雄激素R1881呈浓度依赖性增强SUMO化的AR的转录活性;与单用银杏酸相比,10μmol/L银杏酸联合10μmol/L恩杂鲁胺治疗处理MCF-7R细胞3 d后,细胞数明显降低,细胞死亡数明显增加(P<0.05).结论:他莫昔芬耐药机制可能是由于高活性SUMO化的AR使AR转录增强、活性增高,SUMO抑制剂银杏酸联合AR拮抗剂恩杂鲁胺可成为治疗他莫昔芬耐药的新策略.
作者：孙红；侯佳林；蔡加琴；魏晓霞；庄捷
来源：中国临床药理学与治疗学 2021 年 26卷 3期
