目的:研究天麻素对过氧化氢(H2 O2)损伤的PC12细胞的保护作用及机制.方法:建立H2 O2损伤PC12细胞神经损伤模型.MTT法检测细胞活力并确定H2 O2最佳造模浓度,筛选和确定天麻素最佳处理浓度.试剂盒检测丙二醛(MDA)、总谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)水平和活力变化;流式细胞仪检测细胞脂质活性氧(ROS)水平;透射电子显微镜观察PC12细胞形态变化;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测p53、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)蛋白表达变化.结果:MTT法实验结果显示,50μmol/L H2 O2处理PC12细胞48 h,细胞生长抑制率接近50%;而天麻素(1、5、25μmol/L)预处理4 h可提高H2 O2损伤细胞的存活率,且其作用呈浓度依赖性.MDA、GSH、SOD检测结果表明天麻素降低H2 O2处理后的MDA水平,并提高SOD和GSH活力.流式细胞仪检测发现,H2 O2损伤后细胞内ROS的含量升高,而天麻素预处理后有效降低H2 O2损伤的细胞内ROS的含量.透射电子显微镜观察结果显示,与正常组相比,50μmol/L H2 O2处理后PC12细胞的线粒体脊变厚,线粒体体积变小;天麻素预保护处理后,PC12细胞的线粒体形态趋于正常状态.Western blot结果表明,天麻素预保护后可升高H2 O2损伤后GPX4蛋白表达水平,并降低p53蛋白表达水平.结论:H2 O2可通过增加PC12细胞内氧化应激水平引起铁死
作者:王幼琳;李珊珊;王萌;郭宇婷;程卉;田莎莎;李庆林
来源:中国临床药理学与治疗学 2021 年 26卷 5期