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目的 观察乙酰辅酶A羧化酶(ACC)反义寡核苷酸(ASODN)对HL-7702肝细胞脂肪变性的影响.方法 用计算机软件设计并合成特异性靶向ACC的硫代修饰ASODN.用静脉脂肪乳剂体外培养正常HL-7702肝细胞48 h,制备体外脂肪肝细胞模型.以脂质体法将ACC-ASODN转染至脂肪肝细胞模型,设置空白组(HL-7702肝细胞组)、模型组(脂肪肝细胞模型组)、低高2个浓度实验组(5,10 μmol·L-1ACC-ASODN转染组).以ACC-ASODN转染入脂肪肝细胞模型24h后,放射性同位素技术测定ACC酶活性,HPLC法测定丙二酰辅酶A含量,放射性同位素技术测定肉碱棕榈酰转移酶Ⅰ(CPTⅠ)活性,用全自动生化分析仪测定4组肝细胞内三酰甘油(TG)含量.结果 ACC-ASODN转染入脂肪肝细胞模型24h后,空白组、模型组及低、高2个浓度实验组的肝细胞ACC活性(U)分别是0.74,0.33,0.20,0.18;这4组的细胞内丙二酰辅酶A含量(nmol· L-1)分别是14.3,12.4,7.5,6.8;这4组的细胞CPTI活性(U)分别是1.33,1.47,3.85,3.95;这4组的TG含量分别是0.20,0.52,0.37,0.28 mmol·L-1.模型组与空白组的以上几项指标比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);实验组与模型组的以上几项指标比较,差异均有统计学意义(均P<0.01).结论 ACC-ASODN作用于肝细胞,通过抑制肝细胞ACC活性,使TG含量下降,从而减轻肝细胞

作者:夏晓华;何傲林;李莎莎;王炳芳;方燕斐

来源:中国临床药理学杂志 2018 年 34卷 3期

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作者:
夏晓华;何傲林;李莎莎;王炳芳;方燕斐
来源:
中国临床药理学杂志 2018 年 34卷 3期
标签:
乙酰辅酶A羧化酶 反义寡核苷酸 非酒精性脂肪肝 丙二酰辅酶A 肉碱棕榈酰转移酶Ⅰ acetyl coenzyme A carboxylase antisense oligonucleotide non-alcoholic fatty liver malonyl CoA carnitine palmitoyltransferase Ⅰ
目的 观察乙酰辅酶A羧化酶(ACC)反义寡核苷酸(ASODN)对HL-7702肝细胞脂肪变性的影响.方法 用计算机软件设计并合成特异性靶向ACC的硫代修饰ASODN.用静脉脂肪乳剂体外培养正常HL-7702肝细胞48 h,制备体外脂肪肝细胞模型.以脂质体法将ACC-ASODN转染至脂肪肝细胞模型,设置空白组(HL-7702肝细胞组)、模型组(脂肪肝细胞模型组)、低高2个浓度实验组(5,10 μmol·L-1ACC-ASODN转染组).以ACC-ASODN转染入脂肪肝细胞模型24h后,放射性同位素技术测定ACC酶活性,HPLC法测定丙二酰辅酶A含量,放射性同位素技术测定肉碱棕榈酰转移酶Ⅰ(CPTⅠ)活性,用全自动生化分析仪测定4组肝细胞内三酰甘油(TG)含量.结果 ACC-ASODN转染入脂肪肝细胞模型24h后,空白组、模型组及低、高2个浓度实验组的肝细胞ACC活性(U)分别是0.74,0.33,0.20,0.18;这4组的细胞内丙二酰辅酶A含量(nmol· L-1)分别是14.3,12.4,7.5,6.8;这4组的细胞CPTI活性(U)分别是1.33,1.47,3.85,3.95;这4组的TG含量分别是0.20,0.52,0.37,0.28 mmol·L-1.模型组与空白组的以上几项指标比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);实验组与模型组的以上几项指标比较,差异均有统计学意义(均P<0.01).结论 ACC-ASODN作用于肝细胞,通过抑制肝细胞ACC活性,使TG含量下降,从而减轻肝细胞