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目的:探讨肝细胞生长因子(HGF)和粒细胞集落刺激因子(G-CSF)诱导骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)分化为肝样细胞的可行性.方法:经骨髓分离BM-MSCs并鉴定,将细胞按以下分组进行成肝诱导:G0组(阴性对照)、G1组(20 ng·mL-1 HGF)、G2组(20 ng·mL-1 HGF +5 ng·mL-1 G-CSF)、G3组(20 ng·mL-1 HGF +10 ng·mL-1 G-CSF)、G4组(20 ng·mL-1 HGF +20 ng·mL-1 G-CSF),PAS染色检测肝细胞合成糖原功能,利用RT-PCR检测分化肝细胞的甲胎蛋白(AFP)和白蛋白(ALB)表达.结果:G1~G4组BM-MSCs被诱导后呈现肝样细胞形态改变,以G3、G4明显,G0组细胞无类似变化.G1~G4组诱导第7、14天的细胞PAS染色阳性,G0组呈阴性染色;同一时间点, G1与G2、G3与G4比较,差异无统计学意义(P>0.05);而G3、G4与G2比较, G3、G4组阳性染色率较高(P<0.05).G1~G4组中,诱导AFP于第7天均表达AFP,第14天表达降低,第21天无表达(均P<0.05).ALB在第14天出现表达,第21天表达增多,呈上升趋势(P<0.05).G2与G1、G4与G3之同比较, AFP、ALB灰度比值差异无统计学意义(P>0.05);但G4、G3与G2比较,同一时间点间G4、G3表达水平较高(P<0.05).结论:应用HGF和G-CSF能诱导BM-MSCs向肝样细胞分化.但G-CSF需要达到合适浓度才能与HGF发挥协同作用.

作者:陈念平;伍远维;缪辉来;陈明;邱志东;戴维;周军

来源:中国临床医学 2009 年 16卷 2期

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作者:
陈念平;伍远维;缪辉来;陈明;邱志东;戴维;周军
来源:
中国临床医学 2009 年 16卷 2期
标签:
骨髓间充质干细胞 分化 肝细胞生长因子 粒细胞集落刺激因子
目的:探讨肝细胞生长因子(HGF)和粒细胞集落刺激因子(G-CSF)诱导骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)分化为肝样细胞的可行性.方法:经骨髓分离BM-MSCs并鉴定,将细胞按以下分组进行成肝诱导:G0组(阴性对照)、G1组(20 ng·mL-1 HGF)、G2组(20 ng·mL-1 HGF +5 ng·mL-1 G-CSF)、G3组(20 ng·mL-1 HGF +10 ng·mL-1 G-CSF)、G4组(20 ng·mL-1 HGF +20 ng·mL-1 G-CSF),PAS染色检测肝细胞合成糖原功能,利用RT-PCR检测分化肝细胞的甲胎蛋白(AFP)和白蛋白(ALB)表达.结果:G1~G4组BM-MSCs被诱导后呈现肝样细胞形态改变,以G3、G4明显,G0组细胞无类似变化.G1~G4组诱导第7、14天的细胞PAS染色阳性,G0组呈阴性染色;同一时间点, G1与G2、G3与G4比较,差异无统计学意义(P>0.05);而G3、G4与G2比较, G3、G4组阳性染色率较高(P<0.05).G1~G4组中,诱导AFP于第7天均表达AFP,第14天表达降低,第21天无表达(均P<0.05).ALB在第14天出现表达,第21天表达增多,呈上升趋势(P<0.05).G2与G1、G4与G3之同比较, AFP、ALB灰度比值差异无统计学意义(P>0.05);但G4、G3与G2比较,同一时间点间G4、G3表达水平较高(P<0.05).结论:应用HGF和G-CSF能诱导BM-MSCs向肝样细胞分化.但G-CSF需要达到合适浓度才能与HGF发挥协同作用.