目的 探讨Lin28A基因对胃癌细胞糖酵解的作用及其分子机制.方法 利用慢病毒载体建立Lin28过表达胃癌BGC-823细胞株,以生物化学法检测细胞培养液乳酸含量,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测细胞内磷酸果糖(PFK)含量,蛋白质印迹法检测Lin28A、缺氧诱导因子1o(HIF-1α)、葡萄糖转运蛋白1(GLUT-1)、丙酮酸激酶M2 (PKM2)蛋白水平表达,反转录(RT)-PCR法检测let-7a RNA水平,膜联蛋白(Annexin) Ⅴ-别藻蓝蛋白(APC)单染法检测细胞凋亡.结果 Lin28A蛋白在转染组的表达水平明显高于对照组和空载组(均P<0.001).转染组let-7a RNA表达水平(0.602±0.017)明显低于空载组(1.001 ±0.063) (P=0.005 2).转染组HIF-1 α、GLUT-1、PKM2蛋白的表达水平明显低于其他两组(均P<0.001).对照组、空载组、转染组细胞培养液乳酸含量分别为(1.71±0.13)、(1.53±0.11)、(1.24±0.04) mmol/L,转染组明显低于对照组和空载组(P =0.017 0、0.031 0);细胞内PFK含量分别为(3.71±0.13)、(3.49±0.14)、(1.79±0.05) mmol/L,转染组明显低于对照组和空载组(P=0.014 0、0.036 0);凋亡率分别为5.02%±0.14%、7.16%±0.21%、10.39%±0.37%,转染组凋亡率明显高于对照组和空载组(P =0.000 5、0.000 7).结论 Lin28A过表达可以抑制let-7a表达,并
作者:宋虎;徐为;宋军;梁勇;徐溢新;许腾;郑骏年;彭俊生
来源:中华临床营养杂志 2015 年 23卷 4期