目的：研究RKIP低表达对肝星状细胞（ HSC）在细胞外基质上黏附功能的影响。方法通过 RKIP的 RNAi腺病毒载体感染 HSC细胞株LX-2，实验分为RKIP的RNAi组（RKIP-RNAi-AD）和阴性对照组（NC-RNAi-GFP-AD）。 Western 印迹方法确定病毒感染后验证外源 RKIP在细胞内表达情况。采用matrigel、Ⅰ型胶原及纤维连接蛋白包被的24孔板模拟肝纤维化病理状态下 ECM成分的改变，将腺病毒干预后的 LX-2以1.0×105/ml的浓度接种到包被后24孔板上，37℃培养1 h后，甲醛固定，结晶紫染色。200倍纤维镜下观察并计数黏附的细胞数。结果 RKIP的RNAi组较对照组蛋白表达减少（0.29±0.06 vs 0.73±0.14，P＜0.05）。与 NC-RNAi-GFP-AD对照组相比，RKIP在HSC 的低表达促进细胞在 matrigel上的黏附（170±25 vs 66±12，P＜0.05）。与NC-RNAi-GFP-AD对照组相比，RKIP在HSC 的低表达促进细胞在I型胶原上的黏附（200±25 vs 82±13， P＜0.05）。与NC-RNAi-GFP-AD对照组相比，RKIP在HSC的低表达促进细胞在纤维连接蛋白上的黏附（276±28 vs 96±17，P＜0.05）。结论 SiRNA靶向RKIP可以促进HSC在胶原基质上的粘附。
作者：马俊骥；赵慧；姜慧卿
来源：中国老年学杂志 2014 年 11期
