目的:探讨利用siRNA技术特异性阻断缺氧诱导因子(HIF)-1α基因表达对舌癌Tca8113细胞侵袭和迁移的影响。方法取指数生长期细胞消化计数后按2×105个/孔接种于6孔细胞培养板中,待细胞融合至40%~50%时,将针对 HIF-1α的 siRNA 序列应用 LipofectamineTM 2000转染入Tca8113细胞( siRNA HIF-1α组,干扰组)。半定量 RT-PCR 及 Western 印迹法检测 HIF-1α的 mRNA 及蛋白,四甲基偶氮唑蓝比色法( MTT)检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡率,细胞侵袭实验和划痕实验检测细胞的侵袭和迁移能力。结果 siRNA可以有效沉默 Tca8113细胞HIF-1α基因;干扰组细胞增殖较对照组明显受到抑制,且与细胞凋亡有关,凋亡率显著高于对照组( P<0.05);, siRNA HIF-1α基因转染后的Tca8113细胞黏附能力降低,与对照组比较差异有统计学意义( P<0.05);侵袭能力也下降。结论 siRNA 能够有效沉默 HIF-1α基因,抑制舌癌Tca8113细胞侵袭和迁移,在某种程度上可以改善舌癌细胞的恶性表型,为舌癌的治疗提供思路。
作者:刘圆月
来源:中国老年学杂志 2015 年 12期