目的 通过观察抗氧化酶抑制剂对人肝L02细胞内氧化还原体系的干涉作用,探究超氧阴离子(O-·2)、过氧化氢(H2 O2)和羟自由基(OH·)对细胞自噬发生的影响.方法 体外培养L02细胞,分别或联合给予超氧化物歧化酶(SOD)抑制剂二乙基二硫代氨基甲酸(DETC)、过氧化氢酶(CAT)抑制剂氨基三唑(ATZ)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)抑制剂青霉胺(PEN),培养12 h.采用试剂盒检测细胞内SOD、CAT和GPx的酶活力,O-·2和OH·的产生能力,H2 O2和还原型谷胱甘肽(GSH)的含量;四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞相对活性;采用免疫印迹技术检测自噬标志蛋白表达变化,包括微管相关蛋白1轻链(LC)3、自噬启动蛋白Beclin-1和自噬特异性底物P62;Pearson法分析各项检测指标的相关性.结果 在抗氧化酶抑制剂的干预下,L02细胞内各种抗氧化酶活力均对应性下降,细胞内H2 O2和GSH含量、产生O-·2和OH·能力的变化与相应的抗氧化酶活力相关,自噬标志蛋白LC3、Beclin-1和P62的表达量与细胞产生O-·2的能力相关(均P<0.05).结论 细胞内氧化还原系统中O-·2可能是促进细胞自噬发生的关键分子,而H2 O2及其进一步产生的OH·与细胞自噬发生的关系密切.
作者：王程；纪朋艳；李庆华；李强；安英；隋春红
来源：中国老年学杂志 2019 年 39卷 24期
