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目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)生长特异抑制物(GAS)5调控微小RNA-21(miR-21)对人骨髓间充质干细胞(hBMSC)成骨分化的影响.方法 体外培养hBMSC,分为对照组(不转染)、mimic NC组(转染negative control-GAS5)、GAS5 mimic组(转染GAS5 mimic)、siRNA NC组(转染nonsense siRNA)和GAS5 siRNA组(转染GAS5 siRNA),实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测各组hBMSC中lncRNA GAS5、miR-21及Runt相关转录因子(RUNX)2、骨形态发生蛋白(BMP)2、骨唾液蛋白(BSP)、碱性磷酸酶(ALP)mRNA表达情况;检测各组hBMSC ALP染色情况及ALP活性;Western印迹检测各组hBMSC中RUNX2、BMP2、BSP蛋白表达情况.结果 与mimic NC组相比,GAS5 mimic组hBMSC中lncRNA GAS5水平显著升高(P<0.05),ALP染色明显减弱,ALP活性、miR-21、RUNX2、BMP2、BSP、ALP mRNA水平及RUNX2、BMP2、BSP蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与siRNA NC相比,GAS5 siRNA组hBMSC细胞中lncRNA GAS5水平显著降低(P<0.05),ALP染色明显增强,ALP活性、miR-21、RUNX2、BMP2、BSP、ALP mRNA水平及RUNX2、BMP2、BSP蛋白表达水平显著升高(P<0.05).结论 lncRNA GAS5可能通过下调miR-21表达进而抑制hBMSC成骨分化过程.

作者:王冠贤;李宝林;唐爱民;黄永湘

来源:中国老年学杂志 2022 年 42卷 14期

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作者:
王冠贤;李宝林;唐爱民;黄永湘
来源:
中国老年学杂志 2022 年 42卷 14期
标签:
长链非编码RNA生长特异抑制物5 微小RNA-21 骨髓间充质干细胞 成骨分化
目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)生长特异抑制物(GAS)5调控微小RNA-21(miR-21)对人骨髓间充质干细胞(hBMSC)成骨分化的影响.方法 体外培养hBMSC,分为对照组(不转染)、mimic NC组(转染negative control-GAS5)、GAS5 mimic组(转染GAS5 mimic)、siRNA NC组(转染nonsense siRNA)和GAS5 siRNA组(转染GAS5 siRNA),实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测各组hBMSC中lncRNA GAS5、miR-21及Runt相关转录因子(RUNX)2、骨形态发生蛋白(BMP)2、骨唾液蛋白(BSP)、碱性磷酸酶(ALP)mRNA表达情况;检测各组hBMSC ALP染色情况及ALP活性;Western印迹检测各组hBMSC中RUNX2、BMP2、BSP蛋白表达情况.结果 与mimic NC组相比,GAS5 mimic组hBMSC中lncRNA GAS5水平显著升高(P<0.05),ALP染色明显减弱,ALP活性、miR-21、RUNX2、BMP2、BSP、ALP mRNA水平及RUNX2、BMP2、BSP蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与siRNA NC相比,GAS5 siRNA组hBMSC细胞中lncRNA GAS5水平显著降低(P<0.05),ALP染色明显增强,ALP活性、miR-21、RUNX2、BMP2、BSP、ALP mRNA水平及RUNX2、BMP2、BSP蛋白表达水平显著升高(P<0.05).结论 lncRNA GAS5可能通过下调miR-21表达进而抑制hBMSC成骨分化过程.