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目的 探讨缺氧对孤核受体鸡卵清蛋白上游启动子转录因子(COUP-TF)Ⅱ的影响及分子机制.方法 利用ConTra v2(http://bioit2.irc.ugent.be/contra/v3/)分析COUP-TFⅡ启动子和调控区;创建野生型(WT)COUP-TFⅡ-Luc报告载体,使用荧光素酶实验检测缺氧对COUP-TFⅡ启动子的影响;qRT-聚合酶链反应(PCR)和Western印迹检测缺氧诱导因子(HIF)-1α或HIF-2α对COUP-TFⅡ的影响;使用染色质免疫沉淀分析(ChIP)检测HIF-1α或HIF-2α与COUP-TFⅡHRE的相互作用;构建小鼠后肢缺血模型,使用免疫组化检测缺氧对COUP-TFⅡ影响.结果 COUP-TFⅡ与HIF-1α/HIF-2α 存在一致的缺氧反应元件(HRE);荧光素酶实验显示HRE是缺氧诱导COUP-TFⅡ表达的关键;缺氧可以诱导COUP-TFⅡ表达增加;HIF-1α和HIF-2α可诱导COUP-TFⅡ启动子的激活并与HRE发生相互作用;在体内实验中缺氧可诱导COUP-TFⅡ表达增加.结论 HIF-1α、HIF-2α 可诱导COUP-TFⅡ启动子的转录激活,促进新生血管分化.

作者:许晓亮;刘辉;武燃;王蕾;左伟文;王天涛

来源:中国老年学杂志 2022 年 42卷 21期

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作者:
许晓亮;刘辉;武燃;王蕾;左伟文;王天涛
来源:
中国老年学杂志 2022 年 42卷 21期
标签:
鸡卵清蛋白上游启动子转录因子(COUP-TF)Ⅱ 缺氧诱导因子(HIF)-1α HIF-2α
目的 探讨缺氧对孤核受体鸡卵清蛋白上游启动子转录因子(COUP-TF)Ⅱ的影响及分子机制.方法 利用ConTra v2(http://bioit2.irc.ugent.be/contra/v3/)分析COUP-TFⅡ启动子和调控区;创建野生型(WT)COUP-TFⅡ-Luc报告载体,使用荧光素酶实验检测缺氧对COUP-TFⅡ启动子的影响;qRT-聚合酶链反应(PCR)和Western印迹检测缺氧诱导因子(HIF)-1α或HIF-2α对COUP-TFⅡ的影响;使用染色质免疫沉淀分析(ChIP)检测HIF-1α或HIF-2α与COUP-TFⅡHRE的相互作用;构建小鼠后肢缺血模型,使用免疫组化检测缺氧对COUP-TFⅡ影响.结果 COUP-TFⅡ与HIF-1α/HIF-2α 存在一致的缺氧反应元件(HRE);荧光素酶实验显示HRE是缺氧诱导COUP-TFⅡ表达的关键;缺氧可以诱导COUP-TFⅡ表达增加;HIF-1α和HIF-2α可诱导COUP-TFⅡ启动子的激活并与HRE发生相互作用;在体内实验中缺氧可诱导COUP-TFⅡ表达增加.结论 HIF-1α、HIF-2α 可诱导COUP-TFⅡ启动子的转录激活,促进新生血管分化.