目的:在大肠杆菌中表达重组单纯疱疹病毒2型(HSV-2)抗原.方法:用PCR方法从单纯疱疹病毒中扩增HSV-2 DNA片段,约500bp,克隆到pMD18T载体并对克隆的DNA片段进行序列分析.用限制酶EcoRI和BamHI消化pMD18T/HSV-2重组质粒,分离HSV-2片段,并插入质粒表达载体pBV220的相应限制酶位点,酶谱分析鉴定重组表达载体pBV220/HSV-2.转化菌株经42℃诱导,用SDS-PAGE和Western blot鉴定表达的重组蛋白.结果:PCR扩增的DNA片段与HSV-2的目的片段大小一致.重组质粒pMD18T/HSV-2的DNA序列分析显示克隆的DNA序列与文献报道的HSV-2 DNA序列一致.SDS-PAGE表明重组蛋白相对分子量为18000,表达量达菌体总蛋白的20
作者:许晓群;徐辉;游力;张建;张彩;魏海明
来源:中国麻风皮肤病杂志 2004 年 20卷 4期