目的:明确申克孢子丝菌酵母相对人急性单核细胞白血病细胞(THP-1)NF-κB信号通路激活和肿瘤坏死因子α(TNF-α)分泌的影响.方法:实时荧光定量PCR分析申克孢子丝菌酵母相刺激THP-1细胞TNF-αmRNA的表达,酶联免疫吸附法检测TNF-α分泌量,免疫印迹法分析申克孢子丝菌酵母相体外作用于THP-1细胞后IκBα和磷酸化IκBα的水平,免疫荧光法观察NF-κB-p65核转位.同时设置地塞米松(NF-κB抑制剂)抑制组,并检测100 nM地塞米松预处理THP-1细胞后TNF-αmRNA水平的变化.结果:申克孢子丝菌酵母相刺激THP-1细胞后6 h TNF-αmRNA水平显著高于空白对照组(P<0.001).申克孢子丝菌酵母相刺激THP-1细胞后24 h,TNF-α蛋白水平为(4610.419±121.501)pg/mL,显著高于空白对照组(186.964±98.073)pg/mL,差异具有统计学意义(P<0.001).申克孢子丝菌酵母相作用THP-1细胞后30~60 min,磷酸化IκBα蛋白水平显著升高,为时间依赖性.申克孢子丝菌酵母相组细胞核内NF-κB-p65较空白对照组荧光强度增强.100 nM地塞米松预处理各组THP-1细胞后,TNF-αmRNA水平较前明显降低.结论:人THP-1细胞体外与申克孢子丝菌酵母相作用后激活NF-κB信号通路并上调TNF-α分泌.
作者:刘彩霞;段志敏;杜蕾蕾;曾荣;沈永年;胡素泉;刘维达;陈青;李岷
来源:中国麻风皮肤病杂志 2017 年 33卷 2期