目的:探讨小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblasts,MEFs)滋养层对小鼠诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)适宜的培养条件及其作用机制.方法:取E12.5~14.5d ICR孕鼠,培养小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblasts,MEFs),制备滋养层,收集第2~3代(P2~P3)和第6代(P6)培养2~4d MEFs滋养层细胞培养基(MEF-CM),ELISA检测P2~P3和P6 MEF-CM中Activin A、白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)的浓度水平.iPSCs与滋养层细胞共同培养,并进行细胞鉴定.结果:ELISA检测结果显示P2~P3 MEF-CM中Activin A、LIF的浓度显著高于P6 MEF-CM,差异有显著性意义(P<0.05).iPSCs呈克隆状生长,细胞鉴定结果显示:拟胚体形成;碱性磷酸酶染色呈阳性;0CT4表达阳性.结论:E12.5~14.5d来源的P2~P3 MEFs滋养层能有效的抑制iPSCs的分裂,支持iPSCs的生长并维持其全能性.
作者:孟媛;王红雷;任晓莉;刘丽
来源:中国美容医学 2017 年 26卷 10期