目的:干扰素rhIFN-α 2B体外诱导人胚胎肾细胞系293T细胞获得IFITM3基因,观察IFITM3基因在293T细胞中的表达与定位.方法:利用干扰素rhIFN-α 2B体外诱导293T细胞获得IFITM3基因,采用RT-PCR技术扩增获得干扰素诱导的跨膜蛋白IFITM3全长cDNA,扩增产物连接至pMD18-T载体上,测序正确后,将IFITM3基因亚克隆至真核表达载体pVAX1中获得重组质粒pV-IFITM3,通过转染293T细胞进行表达与定位研究.结果:RT-PCR和Western blot结果表明,获得的目的基因IFITM3能够表达,且具有良好抗原活性;激光共聚焦显微镜观察显示,IFITM3基因表达后主要分布于细胞膜上.结论:成功获得IFITM3基因,并验证了其表达.该研究为基于IFITM3的抗病毒药物以及探讨其抗病毒机制研究奠定了坚实基础.
作者:朱娜;李昌;郭焱;李沂;孙丹丹;任静强;杜寿文;秦艳青;王茂鹏;田宇飞;金宁一
来源:中国免疫学杂志 2012 年 28卷 11期