目的:构建并制备携带目的基因的rAAV2-EGFP-Slug-siRNA-U6( Slug-siRNA) 腺相关病毒载体,探讨Slug 干扰对人胰腺癌细胞株AsPC-1血管生成的影响及其机制.方法:利用以前试验的方法构建重组质粒pSNAV2.0-EGFP-Slug-siRNA-U6.鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)实验检测rAAV2-EGFP-Slug-siRNA-U6对细胞血管生成的影响.Western blot 及RT-PCR方法鉴定转染前后AsPC-1细胞Slug与VEGF蛋白及mRNA表达.结果:携带编码靶向Slug 的小发夹状干扰RNA序列的腺相关病毒载体rAAV2-EGFP-Slug-siRNA-U6成功构建.rAAV2-EGFP-Slug-siRNA-U6抑制细胞血管生成.Slug-siRNA有效抑制AsPC-1细胞Slug与VEGF蛋白及mRNA的表达.结论:rAAV2-EGFP-Slug-siRNA-U6抑制细胞血管生成,其机制可能与干扰Slug及VEGF的表达有关.
作者:崔海宁;陈俭云;王正文;张克君;余壮明;王齐全;王明华;朱东明;宋彩霞;张泽米
来源:中国免疫学杂志 2013 年 29卷 11期