目的 了解载体携带的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对人胰腺癌细胞株PANC-1血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的抑制作用以及对肿瘤细胞生长的影响.方法 设计并合成2对针对VEGF的siRNA真核表达载体(PU-VEGF-siRNAl组和PU-VEGF-siRNA2组,简称为重组质粒组),经脂质体Lipofectamine 2000转染PANC-1细胞,经G418筛选后获得稳定转染细胞株,空载体转染组作为实验对照组,未转染组作为空白对照组.采用MTT法检测转染后PANC-1细胞的增殖,流式细胞仪检测转染后PANC-1细胞的凋亡率和细胞周期,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测转染后VEGF mRNA表达情况.结果 与实验对照组和空白对照组比较,两重组质粒组PANC-1细胞的增殖减慢,细胞凋亡率增加,VEGF mRNA表达明显下降,差异均有统计学意义(P<0.05);细胞周期结果显示,两重组质粒组S期细胞所占比例较两对照组明显减少(P<0.05).结论 siRNA能有效抑制胰腺癌细胞VEGF的表达,并能在体外抑制人胰腺癌细胞株PANC-1细胞的生长.
作者:李善平;刘海威;程乐;张虎;曹登科;李政
来源:中国普外基础与临床杂志 2011 年 18卷 6期