目的：初步探讨IL-7联合IL-2对脐血CD4＋CD25-T细胞体外扩增的促进作用，建立稳定的体外培养扩增脐血CD4＋CD25-Tregs的培养体系，比较诱导扩增后的CD4＋CD25＋Tregs和自然分选的CD4＋CD25＋Tregs对PBMCs功能活性的影响。方法：采用免疫磁珠分选法分选出脐血CD4＋CD25-T细胞和CD4＋CD25＋T细胞；加入不同浓度的细胞因子IL-7结合适当浓度的IL-2作为诱导剂，分析IL-7体外诱导CD4＋CD25-T细胞增殖的有效性及最适浓度。我们利用流式细胞术检测体外扩增后的CD4＋CD25-T细胞表型变化；MTS法检测体外诱导扩增的CD4＋CD25＋Tregs及自然分选的CD4＋CD25＋Tregs分别对成人外周血中单个核细胞增殖的抑制作用；RT-PCR方法分析体外诱导扩增的CD4＋CD25＋Tregs 及自然分选的CD4＋CD25＋Tregs FOXP3基因、IL-10基因和TGF-β基因的cDNA表达的变化。结果：经3周体外培养、各组细胞均有明显的扩增。 IL-7诱导组的扩增最强。体外抑制试验显示体外扩增的Tregs对成人外周血中单个核细胞有明显的抑制作用，IL-7联合IL-2诱导CD4＋CD25-T细胞生成的CD4＋CD25＋Tregs具有较自然分选的CD4＋CD25＋Tregs稍弱的免疫抑制功能，其中IL-7浓度为4 ng／ml，IL-2浓度为2000 U／ml时诱导CD4＋CD25-T细胞生成的CD4＋CD25＋Tregs杀伤活性最强。

作者：仉洁；郝京生；李俊甫；邢龙龙；刘志文；钟理；刘薇

来源：中国免疫学杂志 2014 年 7期