目的：构建肌肉特异性激酶（MuSK）与红色荧光蛋白（mCherry）的重组融合蛋白（MuSK-mCherry），并作为抗原用于重症肌无力（ MG）患者血清中的MuSK抗体（ MuSKAb）的检测。方法：应用PCR技术，从含有mCherry 基因的载体pRSET-B扩增mCherry基因，经T载体（pGEM-T Easy Vector）克隆至含有MuSK细胞外区第22-452位氨基酸肽段基因的载体pMT/BiP/V5-His（ MuSK）上，构建MuSK-mCherry融合荧光蛋白基因。将重组载体转染果蝇S2细胞，表达产物以共聚焦显微镜检查。以MuSK-mCherry融合蛋白作为抗原，应用荧光免疫沉淀试验检测MG患者MuSKAb。结果：成功地构建了MuSK-mCherry融合蛋白基因，并得到了表达。经对已知MuSKAb阳性的MG患者血清中的MuSKAb的检测证实，构建的MuSK-mCherry融合蛋白在荧光免疫沉淀试验中可以检测到MuSKAb。结论：以MuSK细胞外肽段与mCherry构建的融合荧光蛋白作为抗原，可以用于MG患者血清中的MuSKAb的检测。
作者：金权鑫；许嘉珍；魏枫；李芳芳；王岩；李红花；金松竹；孟繁平
来源：中国免疫学杂志 2014 年 10期
