目的：预测鉴定人源α－烯醇化酶蛋白的B细胞抗原表位，探讨人源α－烯醇化酶与牙龈卟啉单胞菌烯醇化酶之间的交叉反应性。方法：以人源α－烯醇化酶蛋白序列为基础，综合应用多个软件预测B细胞线性表位；再以人源α－烯醇化酶的蛋白晶体结构为基础，采用4个生物信息学软件综合预测B细胞构象表位；利用原核表达系统对人源α－烯醇化酶蛋白进行表达、亲和层析法进行，纯化抗原免疫BALB／c小鼠，化学合成预测的线性表位片段检测抗体反应，确定人源α－烯醇化酶蛋白B细胞表位。利用ClustalX进行蛋白质序列比对和Swiss－Model进行同源模建，研究人源α－烯醇化酶和牙龈卟啉单胞菌烯醇化酶的交叉反应性。结果：人源α－烯醇化酶线性B细胞表位优势区域为9－25aa，28－43aa，70－85aa，163－178aa，229－244aa，280－295aa；构象性B细胞表位优势区域为：1－4／24－30／77－86／124aa，9－16／51－59aa，250－254／262－268／271－274aa；合成的线性表位片段中9－25aa免疫应答反应最强烈，其次是70－85aa ，再次为28－43aa，163－178aa，229－244aa，280－295aa；牙龈卟啉单胞菌烯醇化酶和人源α－烯醇化酶氨基酸序列同源性高达50．11％，两者在线性B细胞表位优势区域的9－24aa和32－42aa序列高度相似；空间构象
作者：揭瑞；董佳慧；韩冬；王瑞玲；韩魏巍；杜戎；耿辉
来源：中国免疫学杂志 2015 年 1期
