目的:研究磷脂转运蛋白( Phospholipid transfer protein ,PLTP)对香烟诱导人肺泡上皮A549细胞合成白介素8(Interleukin-8,IL-8)的影响。方法:体外培养人肺泡上皮A549细胞株24 h,加入不同浓度的烟草提取物(Cigarette smoking extracts,CSE)共培养24 h;1.0%CSE与A549细胞株共培养6、12、24、48 h;PLTP siRNA预处理后,加入CSE共培养24 h。3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐( MTT)法检测A549细胞增殖情况;实时定量PCR( RT-PCR)检测PLTP和IL-8 mRNA的表达量;蛋白质印迹法( Western blot )检测PLTP的表达量;酶联免疫吸附法( Enzyme-Linked Immunosorbent Assay , ELISA)检测IL-8相对含量。结果:0.125%烟草提取物促进A549细胞增殖,0.25%、0.5%、1.0% CSE浓度对A549细胞生长无明显影响,而2.0%、4.0%CSE浓度抑制A549细胞增殖;不同浓度的(0.25%、0.5%、1.0%) CSE作用24 h后,PLTP和IL-8 mRNA及蛋白表达量增加,并且IL-8蛋白分泌呈现一定时间依赖性;PLTP siRNA处理后,IL-8表达量明显升高( P<0.001)。结论:PLTP基因缺失促进香烟诱导A549细胞合成IL-8。
作者:余秀英;陈亚娟;巫凤苹;邹琳琳;陈雨晗;黎友伦
来源:中国免疫学杂志 2016 年 32卷 3期