目的：构建结核分枝杆菌（M.tb）Esx-1底物蛋白Rv3615c的原核表达质粒pET30b-Rv3615c并在大肠杆菌BL21（DE3）中进行原核表达；以全血IFN-γ分析试验（WBIA）检测rRv3615c蛋白能否被淮南市M.tb感染者T细胞所识别；在小鼠模型中检测其免疫原性。方法：以分子克隆技术构建重组载体pET30b-Rv3615c并表达、纯化rRv3615c蛋白，以WBIA检测rRv3615 c抗原刺激淮南市M.tb感染者和未感染者外周血淋巴细胞产生的特异性IFN-γ水平。此外联合佐剂SAS免疫C57BL／6小鼠，评价其体液免疫应答和Th1型应答水平。结果：成功构建pET30b-Rv3615c质粒，SDS-PAGE和Western blot显示其正确表达和纯化。 rRv3615 c蛋白特异性刺激淮南市M.tb感染者淋巴细胞产生的IFN-γ浓度显著高于健康对照者。Rv3615c／SAS诱导小鼠产生的IgG、IgG1、IgG2a以及Rv3615c1SAS诱导小鼠脾淋巴细胞分泌的特异性IFN-γ、TNF-α和IL-2，均显著高于PBS组和SAS组，显示rRv3615 c可诱导趋向于Th1型免疫应答。结论：Rv3615 c可被淮南市M.tb感染者T细胞识别，具有较强的免疫原性，是用于结核病（ TB）预防和诊断的潜力靶抗原。
作者：许礼发；王晓春；王健；张荣波
来源：中国免疫学杂志 2016 年 32卷 11期
