目的:通过TIPE3干扰质粒转染SW480结肠癌细胞,验证干扰TIPE3表达对SW480结肠癌细胞生长的影响并探讨相关机制.方法:构建TIPE3-shRNA-pSIREN-RetroQ干扰质粒,通过脂质体转染法成功将干扰质粒导入SW480细胞,通过RT-PCR、Western blot检测重组质粒的干扰效率.应用CCK-8方法检测SW480细胞生存率.AnnexinV-FITC/PI流式细胞法检测细胞凋亡.使用Western blot检测细胞增殖、凋亡相关分子的表达情况.结果:成功设计、构建和筛选具有生物活性且干扰效率最佳的TIPE3-shRNA-pSIREN-RetroQ干扰质粒.CCK-8检测证实干扰SW480结肠癌细胞TIPE3表达可以抑制细胞生长.流式结果显示,TIPE3-shRNA3干扰组的凋亡率为(27.99±1.087)
作者:叶宇涵;刘忠臣;齐忠权;庄国洪;殷平
来源:中国免疫学杂志 2017 年 33卷 3期