目的:探讨Oct4B1基因过表达是否诱导人结直肠癌SW480细胞发生上皮间质转化(EMT)及其可能的机制.方法:用带G418抗性的Oct4B1基因过表达质粒及阴性对照质粒转染人结直肠癌SW480细胞株,分别称为实验组(SW480-Oct4B1)及对照组(SW480-NC),转染成功后用G418筛选建立稳定转染的细胞株,对两种稳定转染细胞进行如下检测:① RT-qPCR检测Oct4B1的mRNA水平;②划痕实验和Transwell小室实验检测迁移和侵袭能力;③Western blot检测EMT相关标记物E-cadherin、N-cadherin及Vimentin蛋白表达;④RT-qPCR和Western blot检测EMT转录因子Twist的mRNA及蛋白表达. 结果:稳定转染细胞株建立后,实验组与对照组比较:Oct4B1基因表达水平明显升高(P<0.01);细胞迁移明显增强(P<0.01);细胞侵袭能力明显提高(P<0.01);上皮标记物E-cadherin蛋白表达量明显下降(P<0.01);而间质标记物N-cadherin及Vimentin蛋白表达量明显上调(P<0.01);Twist 的mRNA及蛋白表达量均明显升高(P<0.01).结论:过表达Oct4B1基因可诱导人结直肠癌SW480细胞发生EMT,增强细胞迁移及侵袭能力,其分子机制可能与提高Twist表达有关.
作者：陈奕霖；文坤明；胡水清；陈正权；曾庆良
来源：中国免疫学杂志 2017 年 33卷 5期
