目的:探究长链非编码RNA HNF1A-AS1通过靶向miR-1对膀胱癌细胞增殖和侵袭的作用.方法:荧光定量检测膀胱癌细胞系和正常泌尿道上皮细胞HNF1A-AS1和miR-1的表达情况;分别过表达或沉默HNF1A-AS1和miR-1,荧光定量检测miR-1的表达情况;荧光素酶报告实验确定HNF1A-AS1与miR-1的靶向关系;分别沉默HNF1A-AS1和miR-1,MTT和侵袭实验检测细胞活性和侵袭能力,免疫印迹检测细胞增殖及侵袭相关蛋白的表达.结果:根据预实验结果选择253J细胞系进行后续实验.HNF1A-AS1过表达可明显抑制miR-1表达(P＜0.05),减弱miR-1 mimic对miR-1表达的促进作用(P＜0.05).沉默HNF1A-AS1可显著促进miR-1表达(P＜0.05),减弱miR-1 inhibitor对miR-1表达的抑制作用(P＜0.05);同时,HNF1A-AS1还可明显减弱带有miR-1片段野生型质粒的荧光素酶活性(P＜0.05);此外,沉默HNF1A-AS1可显著抑制膀胱癌细胞增殖及侵袭(P＜0.05),并且还能显著抑制细胞增殖相关蛋白Ki67、PCNA和侵袭相关蛋白MMP-9、VEGF的表达(P＜0.05);抑制miR-1表达可明显减弱shRNA对癌细胞增殖和侵袭的抑制作用(P＜0.05).结论:沉默HNF1A-AS1可通过靶向上调miR-1表达减弱膀胱癌细胞的增殖和侵袭能力.
作者：吴克；邱明星；王寓
来源：中国免疫学杂志 2018 年 34卷 11期
