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目的:探讨微小RNA-377(miR-377)对硫酯酶超家族成员4(THEM4)的靶向作用及对高糖诱导的人近端肾小管上皮细胞上皮间充质转化(EMT)的影响.方法:将人近端肾小管上皮细胞HK-2分为正常葡萄糖组(NG组:5mmol/L葡萄糖)、高糖组(HG 组:30 mmol/L葡萄糖)、HG+miR-NC 组(HG+转染 miR-NC)、HG+miR-377组(HG+转染 miR-377)、HHG+anti-miR-NC 组(HG+转染 anti-miR-NC)、HG+anti-miR-377组(HG+转染 anti-miR-377)、HG+miR-377+pcDNA3.1 组(HG+共转染 miR-377+pcDNA3.1)、HG+miR-377+pcDNA3.1-THEM4组(HG+共转染 miR-377+pcDNA3.1-THEM4)、HG+miR-377+si-NC 组(HG+共转染 miR-377+si-NC)和 HG+miR-377+si-THEM4组(HG+共转染 miR-377+si-THEM4).qPCR 检测 miR-377表达,Western blot检测Vimentin、E-cadherin、THEM4蛋白表达,生物信息学预测和双荧光素酶实验分析miR-377与THEM4的靶向关系.结果:与NG组相比,HG诱导的HK-2细胞中miR-377表达量、Vimentin蛋白表达量明显增加,E-cadherin蛋白水平显著降低(P<0.05).与HG+miR-NC组相比,HG+miR-377组HK-2细胞的miR-377表达量、Vimentin蛋白表达量显著升高,E-cadherin蛋白水平显著降低(P<0.05).与HG+anti-miR-NC组相比,HG+anti-miR-377组HK-2细胞中miR-377表达量、Vimentin蛋白水平

作者:谭德敏;曾雨如;向海燕;张明霞;刘珊;张瑶

来源:中国免疫学杂志 2021 年 37卷 11期

知识库介绍

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作者:
谭德敏;曾雨如;向海燕;张明霞;刘珊;张瑶
来源:
中国免疫学杂志 2021 年 37卷 11期
标签:
miR-377 THEM4 高糖 人近端肾小管上皮细胞 EMT
目的:探讨微小RNA-377(miR-377)对硫酯酶超家族成员4(THEM4)的靶向作用及对高糖诱导的人近端肾小管上皮细胞上皮间充质转化(EMT)的影响.方法:将人近端肾小管上皮细胞HK-2分为正常葡萄糖组(NG组:5mmol/L葡萄糖)、高糖组(HG 组:30 mmol/L葡萄糖)、HG+miR-NC 组(HG+转染 miR-NC)、HG+miR-377组(HG+转染 miR-377)、HHG+anti-miR-NC 组(HG+转染 anti-miR-NC)、HG+anti-miR-377组(HG+转染 anti-miR-377)、HG+miR-377+pcDNA3.1 组(HG+共转染 miR-377+pcDNA3.1)、HG+miR-377+pcDNA3.1-THEM4组(HG+共转染 miR-377+pcDNA3.1-THEM4)、HG+miR-377+si-NC 组(HG+共转染 miR-377+si-NC)和 HG+miR-377+si-THEM4组(HG+共转染 miR-377+si-THEM4).qPCR 检测 miR-377表达,Western blot检测Vimentin、E-cadherin、THEM4蛋白表达,生物信息学预测和双荧光素酶实验分析miR-377与THEM4的靶向关系.结果:与NG组相比,HG诱导的HK-2细胞中miR-377表达量、Vimentin蛋白表达量明显增加,E-cadherin蛋白水平显著降低(P<0.05).与HG+miR-NC组相比,HG+miR-377组HK-2细胞的miR-377表达量、Vimentin蛋白表达量显著升高,E-cadherin蛋白水平显著降低(P<0.05).与HG+anti-miR-NC组相比,HG+anti-miR-377组HK-2细胞中miR-377表达量、Vimentin蛋白水平