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目的:探究芥子碱对肝癌细胞活力、凋亡及在体肿瘤生长的影响及机制.方法:采用CCK-8实验检测芥子碱对HepG2细胞活力的影响;流式细胞术分析芥子碱对HepG2细胞凋亡率的影响;RNA-Sequence测序分析芥子碱处理后对基因表达的影响;使用基因集富集分析软件分析芥子碱处理后富集的信号通路;Western blot检测芥子碱对p53信号通路蛋白表达的影响;通过裸鼠皮下接种HepG2肿瘤细胞,构建在体肿瘤模型,检测芥子碱对肿瘤生长的影响.结果:CCK-8结果表明,芥子碱能时间、浓度依赖地抑制肝癌HepG2细胞活力;流式细胞分析结果表明,芥子碱能诱导肝癌细胞凋亡,且表现出浓度依赖;动物实验表明,芥子碱能抑制裸鼠皮下肿瘤的生长;GSEA分析发现芥子碱处理后肝癌细胞中p53信号通路显著富集;Westernblot结果表明,芥子碱处理后细胞中p53、p21及Bax蛋白水平显著增加,Bcl-2蛋白水平显著降低;逆转实验表明,敲低p53基因能部分阻遏芥子碱对HepG2细胞活力和凋亡的影响.结论:芥子碱可能通过活化肝癌细胞中的信号通路发挥抗肝癌作用.

作者:高远;李冀;韩东卫

来源:中国免疫学杂志 2021 年 37卷 23期

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作者:
高远;李冀;韩东卫
来源:
中国免疫学杂志 2021 年 37卷 23期
标签:
芥子碱;肝癌;RNA-Seq;p53信号通路
目的:探究芥子碱对肝癌细胞活力、凋亡及在体肿瘤生长的影响及机制.方法:采用CCK-8实验检测芥子碱对HepG2细胞活力的影响;流式细胞术分析芥子碱对HepG2细胞凋亡率的影响;RNA-Sequence测序分析芥子碱处理后对基因表达的影响;使用基因集富集分析软件分析芥子碱处理后富集的信号通路;Western blot检测芥子碱对p53信号通路蛋白表达的影响;通过裸鼠皮下接种HepG2肿瘤细胞,构建在体肿瘤模型,检测芥子碱对肿瘤生长的影响.结果:CCK-8结果表明,芥子碱能时间、浓度依赖地抑制肝癌HepG2细胞活力;流式细胞分析结果表明,芥子碱能诱导肝癌细胞凋亡,且表现出浓度依赖;动物实验表明,芥子碱能抑制裸鼠皮下肿瘤的生长;GSEA分析发现芥子碱处理后肝癌细胞中p53信号通路显著富集;Westernblot结果表明,芥子碱处理后细胞中p53、p21及Bax蛋白水平显著增加,Bcl-2蛋白水平显著降低;逆转实验表明,敲低p53基因能部分阻遏芥子碱对HepG2细胞活力和凋亡的影响.结论:芥子碱可能通过活化肝癌细胞中的信号通路发挥抗肝癌作用.