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目的 研究脑红蛋白(Ngb)在大鼠蛛网膜下腔出血(SAH)模型脑组织中的表达.方法 将成年雄性Sprague-Dawley大鼠84只,随机分为对照组(12只)和SAH组(72只),SAH组再分为模型建立后3、6、12、24、48及72 h共6个亚组(每组12只).通过改良后视交叉池注血法建立大鼠SAH模型.应用Western Blot、实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法和免疫组化法,检测SAH后不同时间点脑组织中Ngb蛋白及其mRNA的表达水平水平变化和分布.结果 ①Western Blot结果显示,大鼠正常脑组织中Ngb含量较少(0.56±0.14).SAH后3h脑组织中Ngb表达蛋白水平开始升高(0.77 ±0.16),24 h达到高峰(1.27 ±0.18),与对照组比较,差异有统计学意义,P<0.05;其后逐渐下降.②实时荧光定量RT-PCR结果显示,大鼠脑组织Ngb mRNA从SAH后3h开始增加,6h达高峰,随后逐渐下降,至72 h基本下降到对照组水平.其中6h及12h组与对照组相比,差异有统计学意义,均P<0.01.③免疫组化染色结果显示,对照组大鼠脑组织中有少量Ngb表达阳性细胞,但多呈弱阳性表达,且在颞叶皮质表达较多,海马区也有少量表达;SAH后Ngb阳性细胞明显增多,并且多数呈强阳性表达,在颞叶皮质增高最明显.结论 大鼠SAH后脑组织内Ngb蛋白及mRNA水平表达均上调,提示Ngb可能参与对SAH后早期脑损伤的保护作用.

作者:李维德;孙青;李松;杭春华

来源:中国脑血管病杂志 2013 年 10卷 8期

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作者:
李维德;孙青;李松;杭春华
来源:
中国脑血管病杂志 2013 年 10卷 8期
标签:
蛛网膜下腔出血 脑红蛋白 蛋白质印迹法 免疫组织化学 实时荧光定量逆转录聚合酶链反应 大鼠 Subarachnoid hemorrhage Neuroglobin Western blotting Immunohistochemistry Real-time reverse transcription polymerase chain reaction Rats
目的 研究脑红蛋白(Ngb)在大鼠蛛网膜下腔出血(SAH)模型脑组织中的表达.方法 将成年雄性Sprague-Dawley大鼠84只,随机分为对照组(12只)和SAH组(72只),SAH组再分为模型建立后3、6、12、24、48及72 h共6个亚组(每组12只).通过改良后视交叉池注血法建立大鼠SAH模型.应用Western Blot、实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法和免疫组化法,检测SAH后不同时间点脑组织中Ngb蛋白及其mRNA的表达水平水平变化和分布.结果 ①Western Blot结果显示,大鼠正常脑组织中Ngb含量较少(0.56±0.14).SAH后3h脑组织中Ngb表达蛋白水平开始升高(0.77 ±0.16),24 h达到高峰(1.27 ±0.18),与对照组比较,差异有统计学意义,P<0.05;其后逐渐下降.②实时荧光定量RT-PCR结果显示,大鼠脑组织Ngb mRNA从SAH后3h开始增加,6h达高峰,随后逐渐下降,至72 h基本下降到对照组水平.其中6h及12h组与对照组相比,差异有统计学意义,均P<0.01.③免疫组化染色结果显示,对照组大鼠脑组织中有少量Ngb表达阳性细胞,但多呈弱阳性表达,且在颞叶皮质表达较多,海马区也有少量表达;SAH后Ngb阳性细胞明显增多,并且多数呈强阳性表达,在颞叶皮质增高最明显.结论 大鼠SAH后脑组织内Ngb蛋白及mRNA水平表达均上调,提示Ngb可能参与对SAH后早期脑损伤的保护作用.